Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Gel electrophoresis သည် DNA၊ RNA နှင့် ပရိုတိန်းကဲ့သို့သော macromolecules များကို ခွဲထုတ်ရန် ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာ ပညာရပ်များကို ဖြတ်ကျော်သည့် ဓာတ်ခွဲခန်းရှိ အခြေခံနည်းပညာတစ်ခုဖြစ်သည်။ ကွဲပြားသော သီးခြားမီဒီယာနှင့် ယန္တရားများသည် ဤမော်လီကျူးများ၏ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာလက္ခဏာများကို အသုံးချခြင်းဖြင့် ပိုမိုထိရောက်စွာ ခွဲထုတ်နိုင်စေပါသည်။ အထူးသဖြင့် ပရိုတိန်းများအတွက်၊ polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) သည် မကြာခဏရွေးချယ်သည့်နည်းပညာဖြစ်သည်။
PAGE သည် ၎င်းတို့၏ electrophoretic ရွေ့လျားနိုင်မှုအပေါ်အခြေခံ၍ ပရိုတင်းများကဲ့သို့သော macromolecules များကို ပိုင်းခြားပေးသည့် နည်းပညာတစ်ခုဖြစ်ပြီး၊ ဆိုလိုသည်မှာ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု၏စွမ်းရည်သည် ဆန့်ကျင်ဘက်အား၏လျှပ်ကူးပစ္စည်းတစ်ခုဆီသို့ ရွေ့လျားရန်ဖြစ်သည်။ PAGE တွင်၊ ၎င်းကို အားသွင်းမှု၊ အရွယ်အစား (မော်လီကျူးအလေးချိန်) နှင့် မော်လီကျူး၏ ပုံသဏ္ဍာန်တို့ဖြင့် ဆုံးဖြတ်သည်။ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာသူများသည် polyacrylamide gel ဖြင့်ဖွဲ့စည်းထားသော ချွေးပေါက်များမှတဆင့် ရွေ့လျားသည်။ DNA နှင့် RNA တို့နှင့်မတူဘဲ ပရိုတင်းများသည် ၎င်းတို့လည်ပတ်ပုံအပေါ် လွှမ်းမိုးနိုင်သည့် အမိုင်နိုအက်ဆစ်များ ပေါင်းစပ်ပါဝင်မှုအလိုက် တာဝန်ခံမှု ကွဲပြားသည်။ အမိုင်နိုအက်ဆစ်ကြိုးများသည် ၎င်းတို့၏ ထင်ရှားသောအရွယ်အစားကို သက်ရောက်မှုရှိပြီး ချွေးပေါက်များအတွင်း မည်ကဲ့သို့ ရွေ့လျားနိုင်သည်ဖြစ်စေ ဆင့်ပွားဖွဲ့စည်းပုံများလည်း ဖြစ်ပေါ်လာနိုင်သည်။ ထို့ကြောင့် အရွယ်အစားကို ပိုမိုတိကျသော ခန့်မှန်းချက်လိုအပ်ပါက ၎င်းတို့ကို linearize ပြုလုပ်ရန် electrophoresis မတိုင်မီ denature proteins များကို တစ်ခါတစ်ရံတွင် နှစ်လိုဖွယ်ဖြစ်နိုင်သည်။
SDS စာမျက်နှာ
Sodium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis သည် ဒြပ်ထု 5 မှ 250 kDa မှ ပရိုတိန်းမော်လီကျူးများကို ပိုင်းခြားရန် အသုံးပြုသည့် နည်းပညာတစ်ခုဖြစ်သည်။ ပရိုတင်းများကို ၎င်းတို့၏ မော်လီကျူးအလေးချိန်အပေါ် အခြေခံ၍ ခွဲထားသည်။ anionic surfactant တစ်ခုဖြစ်သော Sodium dodecyl sulfate သည် ပရိုတင်းနမူနာများ၏ ပင်ကိုယ်စွဲချက်ကို ဖုံးကွယ်ထားပြီး ၎င်းတို့အား ထုထည်အချိုးနှင့် တူညီသော အခကြေးငွေကိုပေးဆောင်သည့် ဂျယ်များပြင်ဆင်မှုတွင် ထည့်သွင်းထားသည်။ ရိုးရိုးရှင်းရှင်းပြောရရင်တော့ ပရိုတင်းတွေကို ဆန့်ကျင်ပြီး အနုတ်လက္ခဏာဆောင်တဲ့ အားကိုပေးတယ်။
ဇာတိ စာမျက်နှာ
Native PAGE သည် ပရိုတင်းများကို ခွဲထုတ်ရန်အတွက် သဘာဝမဟုတ်သော ဂျယ်လ်များကို အသုံးပြုသည့် နည်းလမ်းတစ်ခုဖြစ်သည်။ SDS PAGE နှင့်မတူဘဲ၊ ဂျယ်များပြင်ဆင်မှုတွင် denaturing အေးဂျင့်မထည့်ပါ။ ရလဒ်အနေဖြင့် ပရိုတင်းများကို ခွဲထုတ်ခြင်းသည် ပရိုတင်းများ၏ တာဝန်ခံမှုနှင့် အရွယ်အစားအပေါ် အခြေခံ၍ ဖြစ်ပွားသည်။ ဤနည်းစနစ်တွင် ပရိုတင်းများ၏ ပေါင်းစပ်ခြင်း၊ ခေါက်ခြင်းနှင့် အမိုင်နိုအက်ဆစ်ကွင်းဆက်များသည် ခွဲထွက်ခြင်းအပေါ် မူတည်သည့်အချက်များဖြစ်သည်။ ဤလုပ်ငန်းစဉ်တွင် ပရိုတင်းများကို မပျက်စီးဘဲ ခွဲထုတ်ပြီးနောက် ပြန်လည်ကောင်းမွန်လာနိုင်သည်။
polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ဘယ်လိုအလုပ်လုပ်သလဲ။
PAGE ၏ အခြေခံနိယာမမှာ လျှပ်စစ်စီးကြောင်းကို အသုံးပြု၍ polyacrylamide gel ၏ ချွေးပေါက်များမှတဆင့် ၎င်းတို့အား ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုများကို ခွဲထုတ်ရန်ဖြစ်သည်။ ၎င်းကိုအောင်မြင်ရန်၊ ammonium persulfate (APS) ပေါင်းထည့်ခြင်းဖြင့် acrylamide-bisacrylamide ရောစပ်မှု (polyacrylamide) ကို ပိုလီမာပြုလုပ်သည်။ tetramethylethylenediamine (TEMED) ဖြင့် ဓာတ်ပြုထားသည့် တုံ့ပြန်မှုသည် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုမှတစ်ဆင့် ရွေ့လျားနိုင်သည့် ချွေးပေါက်များရှိသည့် ပိုက်ကွန်ကဲ့သို့ ပိုက်ကွန်ပုံစံ (ပုံ 2) ဖြစ်သည်။ ဂျယ်တွင်ပါဝင်သော စုစုပေါင်း acrylamide ရာခိုင်နှုန်း ပိုများလေ၊ ချွေးပေါက် အရွယ်အစား သေးငယ်လေ၊ ထို့ကြောင့် ဖြတ်သန်းနိုင်သည့် ပရိုတင်းများ သေးငယ်လေ ဖြစ်သည်။ acrylamide နှင့် bisacrylamide ၏အချိုးသည် ချွေးပေါက်အရွယ်အစားကိုလည်း သက်ရောက်မှုရှိလိမ့်မည်ဖြစ်သော်လည်း ၎င်းကို မကြာခဏ မြဲမြံစေပါသည်။ သေးငယ်သော ချွေးပေါက် အရွယ်အစားများသည် gel မှတဆင့် ပရိုတင်းငယ်များ ရွေ့လျားနိုင်သည့် အရှိန်ကိုလည်း လျှော့ချပေးကာ ၎င်းတို့၏ ကြည်လင်ပြတ်သားမှုကို ပိုမိုကောင်းမွန်စေပြီး လျှပ်စီးကြောင်းကို အသုံးပြုသည့်အခါ ကြားခံအတွင်းသို့ လျင်မြန်စွာ လည်ပတ်ခြင်းမှ ကာကွယ်ပေးပါသည်။
Polyacrylamide Gel Electrophoresis အတွက် စက်ပစ္စည်း
Gel Electrophoresis Cell (တိုင်ကီ/အခန်း)
polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) အတွက် gel tank သည် agarose gel tank နှင့် ကွဲပြားသည်။ agarose gel tank သည် အလျားလိုက်ဖြစ်ပြီး PAGE tank သည် ဒေါင်လိုက်ဖြစ်သည်။ ဒေါင်လိုက် electrophoresis cell ( tank/chamber ) အားဖြင့် ပါးလွှာသော ဂျယ် (ပုံမှန်အားဖြင့် 1.0mm သို့မဟုတ် 1.5mm) ကို ဖန်ပြားနှစ်ခုကြားတွင် လောင်းထည့်ပြီး တပ်ဆင်ထားသောကြောင့် gel ၏အောက်ခြေကို အခန်းတစ်ခုတွင် ကြားခံထဲတွင် နစ်မြုပ်သွားစေရန်နှင့် အပေါ်ပိုင်းကို ကြားခံတွင် မြုပ်စေပါသည်။ အခြားအခန်းတွင်။ လက်ရှိအသုံးပြုသည့်အခါ၊ ကြားခံပမာဏအနည်းငယ်သည် ထိပ်ခန်းမှ အောက်ခန်းသို့ ဂျယ်လ်မှတဆင့် ရွေ့ပြောင်းသည်။ တပ်ဆင်အား မတ်တတ်အနေအထားတွင်ရှိနေစေရန် ခိုင်ခံ့သောကုပ်များနှင့်အတူ၊ ကိရိယာသည် ဂျယ်လ်အအေးခံသည့်တိုင် လျင်မြန်စွာလည်ပတ်နိုင်သဖြင့် ကွဲပြားသောကြိုးများကို ဖြစ်ပေါ်စေသည်။
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) သည် polyacrylamide gel electrophoresis cells (ကန်များ/အခန်းများ) ၏ အရွယ်အစားအမျိုးမျိုးကို ထုတ်လုပ်ပါသည်။ မော်ဒယ်များ DYCZ-20C နှင့် DYCZ-20G များသည် DNA sequencing ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအတွက် ဒေါင်လိုက် electrophoresis ဆဲလ်များ (ကန်များ/အခန်းများ) ဖြစ်သည်။ ဒေါင်လိုက်လျှပ်စစ်ဖိုရစစ်ဆဲလ်အချို့ (ကန်များ/အခန်းများ) သည် မော်ဒယ် DYCZ-24DN၊ DYCZ-25D နှင့် DYCZ-25E ကဲ့သို့သော blotting system နှင့် တွဲဖက်အသုံးပြုနိုင်ပြီး Western Blotting စနစ်မော်ဒယ် DYCZ-40D၊ DYCZ-40G နှင့် DYCZ-40F၊ ပရိုတင်းမော်လီကျူးကို ဂျယ်လ်မှ အမြှေးပါးသို့ လွှဲပြောင်းရန်အတွက် အသုံးပြုသည်။ SDS-PAGE electrophoresis ပြီးနောက်၊ Western Blotting သည် ပရိုတင်းအရောအနှောထဲတွင် တိကျသော ပရိုတင်းဓာတ်ကို ရှာဖွေဖော်ထုတ်သည့် နည်းလမ်းတစ်ခုဖြစ်သည်။ စမ်းသပ်မှုလိုအပ်ချက်များအရ ဤ blotting စနစ်များကို သင်ရွေးချယ်နိုင်သည်။
Electrophoresis ပါဝါထောက်ပံ့မှု
ဂျယ်ကိုလည်ပတ်ရန်အတွက်လျှပ်စစ်ဓာတ်အားပံ့ပိုးရန်၊ သင်သည် electrophoresis ပါဝါထောက်ပံ့မှုလိုအပ်လိမ့်မည်။ Liuyi Biotechnology တွင် ကျွန်ုပ်တို့သည် အသုံးပြုမှုအားလုံးအတွက် electrophoresis ပါဝါထောက်ပံ့မှု အမျိုးမျိုးကို ပေးဆောင်ပါသည်။ မော်ဒယ် DYY-12 နှင့် DYY-12C သည် မြင့်မားသောတည်ငြိမ်သောဗို့အားနှင့်လျှပ်စီးကြောင်းပါရှိသော မြင့်မားသောဗို့အားလိုအပ်ချက် electrophoresis ကိုဖြည့်ဆည်းပေးနိုင်သည်။ ၎င်းတွင် မတ်တပ်ရပ်ခြင်း၊ အချိန်ကိုက်ခြင်း၊ VH နှင့် အဆင့်ဆင့် အသုံးချမှုတို့ ပါဝင်သည်။ ၎င်းတို့သည် IEF နှင့် DNA sequencing electrophoresis application အတွက် စံပြဖြစ်သည်။ ယေဘူယျပရိုတိန်းနှင့် DNA electrophoresis လျှောက်လွှာအတွက်၊ ကျွန်ုပ်တို့တွင် electrophoresis ဆဲလ်များ (ကန်များ/အခန်းများ) ပါ၀င်သည့် အရောင်းရဆုံး ပါဝါထောက်ပံ့သည့် မော်ဒယ် DYY-2C၊ DYY-6C၊ DYY-10 စသည်တို့လည်း ရှိသည်။ ဤအရာများကို ကျောင်းဓာတ်ခွဲခန်းအသုံးပြုမှု၊ ဆေးရုံဓာတ်ခွဲခန်းစသည်ဖြင့် အလယ်အလတ်နှင့် အနိမ့်ဗို့အားလျှပ်စီးလျှပ်စစ်အက်ပလီကေးရှင်းများအတွက် အသုံးပြုနိုင်သည်။ ပါဝါထောက်ပံ့မှုများအတွက် နောက်ထပ်မော်ဒယ်များ၊ ကျွန်ုပ်တို့၏ဝဘ်ဆိုဒ်သို့ ဝင်ရောက်ကြည့်ရှုပါ။
Liuyi အမှတ်တံဆိပ်သည် တရုတ်နိုင်ငံတွင် နှစ်ပေါင်း 50 ကျော် သမိုင်းကြောင်းရှိပြီး ကုမ္ပဏီသည် ကမ္ဘာတစ်ဝှမ်းလုံးတွင် တည်ငြိမ်ပြီး အရည်အသွေးမြင့် ထုတ်ကုန်များကို ပံ့ပိုးပေးနိုင်ပါသည်။ နှစ်များ ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုအားဖြင့်၊ ၎င်းသည် သင့်ရွေးချယ်မှုနှင့် ထိုက်တန်ပါသည်။
ကျွန်ုပ်တို့အကြောင်း ပိုမိုသိရှိလိုပါက အီးမေးလ်ဖြင့် ကျွန်ုပ်တို့ထံ ဆက်သွယ်ပါ။[အီးမေးလ်ကို ကာကွယ်ထားသည်] or [အီးမေးလ်ကို ကာကွယ်ထားသည်].
ရည်ညွှန်းချက်များ polyacrylamide gel electrophoresis ဆိုသည်မှာ အဘယ်နည်း။
1. Karen Steward PhD Polyacrylamide gel electrophoresis၊ အလုပ်လုပ်ပုံ၊ နည်းပညာမျိုးကွဲများနှင့် ၎င်း၏အသုံးချပရိုဂရမ်များ
စာတိုက်အချိန်- မေလ ၂၃-၂၀၂၂