Comet Assay- DNA ပျက်စီးမှုကို စစ်ဆေးခြင်းနှင့် ပြုပြင်ခြင်းအတွက် အာရုံခံနည်းပညာ

Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) သည် ဆဲလ်တစ်ခုချင်းစီရှိ DNA ပျက်စီးမှုနှင့် ပြုပြင်မှုများကို ရှာဖွေရန် အဓိကအသုံးပြုသည့် အကဲဆတ်ပြီး လျင်မြန်သော နည်းပညာတစ်ခုဖြစ်သည်။ "Comet Assay" ဟူသော အမည်သည် ရလဒ်များတွင် ပေါ်လာသည့် ကြယ်တံခွန်သဏ္ဍာန်မှ ဆင်းသက်လာသည်- ဆဲလ်၏ နျူကလိယသည် "ဦးခေါင်း" ကို ဖွဲ့စည်းကာ ပျက်စီးနေသော DNA အပိုင်းအစများ ရွေ့ပြောင်းကာ ကြယ်တံခွန်ကဲ့သို့ "အမြီး" ကို ဖန်တီးသည်။

၃

စာမူ

Comet Assay ၏နိယာမသည် လျှပ်စစ်စက်ကွင်းအတွင်း DNA အပိုင်းအစများ ရွှေ့ပြောင်းခြင်းအပေါ် အခြေခံသည်။ ပျက်စီးနေသော သို့မဟုတ် ကွဲအက်နေသော DNA သည် ကြယ်တံခွန်၏ “အမြီး” ဆီသို့ ကူးပြောင်းသွားချိန်တွင် မပျက်မစီးသော DNA သည် ဆဲလ်နျူကလိယအတွင်းတွင် ရှိနေသည်။ အမြီး၏အရှည်နှင့် ပြင်းထန်မှုသည် DNA ပျက်စီးမှုအတိုင်းအတာနှင့် တိုက်ရိုက်အချိုးကျပါသည်။

လုပ်ထုံးလုပ်နည်း

  1. ဆဲလ်ဘိတ်: စမ်းသပ်မည့်ဆဲလ်များကို အရည်ပျော်မှတ်နည်း agarose နှင့် ရောစပ်ပြီး တူညီသောအလွှာတစ်ခုအဖြစ် အဏုစကုပ်များပေါ်တွင် ဖြန့်ခင်းထားသည်။
  2. ဆဲလ် Lysis: ဆဲလ်အမြှေးပါးနှင့် နျူကလီးယားအမြှေးပါးများကို ဖယ်ရှားရန် DNA ကို ဖော်ထုတ်ရန် ဆလိုက်များကို ဆလိုက်များဖြင့် နှစ်မြှုပ်ထားသည်။
  3. Electrophoresis: ဆလိုက်များကို အယ်ကာလိုင်း သို့မဟုတ် ကြားနေအခြေအနေများအောက်တွင် electrophoresis chamber တွင်ထားရှိပါ။ ပျက်စီးနေသော DNA အပိုင်းအစများသည် လျှပ်စစ်စက်ကွင်း၏ လွှမ်းမိုးမှုအောက်တွင် အပြုသဘောဆောင်သော လျှပ်ကူးပစ္စည်းဆီသို့ ရွေ့ပြောင်းသွားသည်။
  4. စွန်းထင်းခြင်း။: electrophoresis ပြီးနောက်၊ ဆလိုက်များသည် DNA ကိုမြင်ယောင်ရန် ချောင်းဆိုးဆေး (ဥပမာ၊ ethidium bromide) ဖြင့် စွန်းထင်းနေပါသည်။
  5. Microscopic Analysis− fluorescence microscope သို့မဟုတ် အထူးပြုဆော့ဖ်ဝဲလ်ကို အသုံးပြု၍ ကြယ်တံခွန်ပုံသဏ္ဍာန်များကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာပြီး အမြီးအရှည်နှင့် ပြင်းထန်မှုကဲ့သို့သော ကန့်သတ်ချက်များကို တိုင်းတာသည်။

၂

biorender မှပုံ

ဒေတာခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း။

Comet Assay မှ ရလဒ်များကို အဓိက ကန့်သတ်ဘောင်များပေါ်တွင် အခြေခံ၍ အကဲဖြတ်သည်-

  • အမြီးအရှည်: DNA ရွေ့ပြောင်းသည့် အကွာအဝေးကို ကိုယ်စားပြုပြီး DNA ပျက်စီးမှုအတိုင်းအတာကို ကိုယ်စားပြုသည်။
  • အမြီး DNA အကြောင်းအရာ: အမြီးထဲသို့ ရွှေ့ပြောင်းသွားသော DNA ရာခိုင်နှုန်းကို DNA ပျက်စီးမှု၏ အရေအတွက် တိုင်းတာမှုအဖြစ် အသုံးပြုလေ့ရှိသည်။
  • Olive Tail Moment (OTM): DNA ပျက်စီးမှုကို ပိုမိုပြည့်စုံသောတိုင်းတာမှုပေးရန်အတွက် အမြီးအရှည်နှင့် အမြီး DNA ပါဝင်မှုနှစ်ခုလုံးကို ပေါင်းစပ်ထားသည်။

အသုံးချမှု

  1. Genotoxicity လေ့လာရေး: Comet Assay ကို ဆဲလ် DNA ပေါ်ရှိ ဓာတုပစ္စည်းများ၊ ဆေးဝါးများနှင့် ဓာတ်ရောင်ခြည်ဖြာထွက်မှုဆိုင်ရာ သက်ရောက်မှုများကို အကဲဖြတ်ရန် ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့် အသုံးပြုထားပြီး ၎င်းသည် မျိုးဗီဇစစ်ဆေးခြင်းအတွက် အဓိက ကိရိယာတစ်ခုဖြစ်သည်။
  2. ပတ်ဝန်းကျင်အဆိပ်ဗေဒ: ၎င်းသည် သက်ရှိများ၏ DNA ပေါ်ရှိ ပတ်ဝန်းကျင်ညစ်ညမ်းမှုများ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုကို ပိုင်းခြားစိတ်ဖြာကာ ဂေဟစနစ်ဘေးကင်းရေးဆိုင်ရာ ထိုးထွင်းသိမြင်မှုများကို ပံ့ပိုးပေးသည်။
  3. ဆေးဘက်ဆိုင်ရာနှင့်လက်တွေ့သုတေသန: Comet Assay ကို DNA ပြုပြင်မှု ယန္တရားများ၊ ကင်ဆာနှင့် အခြား DNA ဆိုင်ရာ ရောဂါများကို လေ့လာရာတွင် အသုံးပြုသည်။ ဓာတ်ရောင်ခြည်ကုထုံးနှင့် DNA ပေါ်ရှိ ဓာတုကုထုံးများကဲ့သို့သော ကင်ဆာကုထုံးများ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုကိုလည်း အကဲဖြတ်သည်။
  4. အစားအစာနှင့် စိုက်ပျိုးရေးသိပ္ပံ: ပိုးသတ်ဆေးများ၊ အစားအသောက်ထည့်ပစ္စည်းများနှင့် အခြားပစ္စည်းများ၏ ဘေးကင်းမှုကို အကဲဖြတ်ရန်နှင့် တိရစ္ဆာန်ပုံစံများတွင် ၎င်းတို့၏ အဆိပ်သက်ရောက်မှုများကို လေ့လာရန် အသုံးပြုသည်။

အားသာချက်များ

  • Sensitivity မြင့်မားသည်။: DNA ပျက်စီးမှု အဆင့်နိမ့်ကြောင်းကို ထောက်လှမ်းနိုင်သည် ။
  • ရိုးရှင်းသောလည်ပတ်မှု: နည်းပညာသည် ရိုးရှင်းသောကြောင့် ၎င်းကို high-throughput screening အတွက် သင့်လျော်စေသည်။
  • ကျယ်ပြန့်သောလျှောက်လွှာ: ၎င်းကို တိရစ္ဆာန်နှင့် အပင်ဆဲလ်များအပါအဝင် ဆဲလ်အမျိုးအစားအမျိုးမျိုးတွင် အသုံးချနိုင်သည်။
  • Quantification စိန်ခေါ်မှုများ: DNA ပျက်စီးမှုဆိုင်ရာ အရည်အသွေးဆိုင်ရာ အချက်အလက်များကို ပံ့ပိုးပေးသော်လည်း ပမာဏခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုသည် ဆော့ဖ်ဝဲလ်နှင့် ရုပ်ပုံပိုင်းခြားစိတ်ဖြာမှုဆိုင်ရာ နည်းပညာများအပေါ်တွင် များစွာမှီခိုနေပါသည်။
  • စမ်းသပ်မှုအခြေအနေများ: ရလဒ်များကို စမ်းသပ်မှုအခြေအနေများကို ဂရုတစိုက်ထိန်းချုပ်ရန်လိုအပ်သည့် electrophoresis အချိန်နှင့် pH ကဲ့သို့သော အကြောင်းရင်းများက လွှမ်းမိုးနိုင်သည်။

ကန့်သတ်ချက်များ

Comet Assay သည် DNA ပျက်စီးမှုနှင့် ပြုပြင်မှုကို ထောက်လှမ်းရာတွင် ၎င်း၏ပြောင်းလွယ်ပြင်လွယ်နှင့် မြင့်မားသော အာရုံခံနိုင်စွမ်းတို့ကြောင့် ဇီဝဆေးသုတေသန၊ ပတ်ဝန်းကျင်သိပ္ပံနှင့် ဆေးဝါးဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးတို့တွင် အဖိုးမဖြတ်နိုင်သော ကိရိယာတစ်ခုဖြစ်သည်။ Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)ကြယ်တံခွန်စစ်ဆေးမှုအတွက် အလျားလိုက် electrophoresis အခန်းကို ပံ့ပိုးပေးသည်။ ဆွေးနွေးရန် ကျွန်ုပ်တို့နှင့် ဆက်သွယ်ရန် ကြိုဆိုပါသည်။Comet Assayပရိုတိုကော။

၁

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) သည် ကျွန်ုပ်တို့၏ကိုယ်ပိုင်ပရော်ဖက်ရှင်နယ်နည်းပညာအဖွဲ့နှင့် R&D စင်တာဖြင့် နှစ်ပေါင်း 50 ကျော်ကြာ electrophoresis တူရိယာများထုတ်လုပ်ရာတွင် အထူးပြုထားပါသည်။ ကျွန်ုပ်တို့တွင် ဒီဇိုင်းမှစစ်ဆေးခြင်းအထိ၊ ဂိုဒေါင်အပြင် စျေးကွက်ရှာဖွေရေးပံ့ပိုးမှုအထိ ယုံကြည်စိတ်ချရပြီး ပြီးပြည့်စုံသောထုတ်လုပ်မှုလိုင်းရှိသည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏အဓိကထုတ်ကုန်များမှာ Electrophoresis Cell ( tank/chamber), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System စသည်တို့ဖြစ်သည်။ ကျွန်ုပ်တို့သည် ဓာတ်ခွဲခန်းအတွက် PCR တူရိယာ၊ vortex mixer နှင့် centrifuge ကဲ့သို့သော ဓာတ်ခွဲခန်းတူရိယာများကို ထောက်ပံ့ပေးပါသည်။

ကျွန်ုပ်တို့၏ထုတ်ကုန်များအတွက် ဝယ်ယူမှုအစီအစဉ်ရှိပါက ကျွန်ုပ်တို့ထံ ဆက်သွယ်ရန် မတွန့်ဆုတ်ပါနှင့်။ အီးမေးလ်ဖြင့် ကျွန်ုပ်တို့ထံ စာတိုပေးပို့နိုင်ပါသည်။[အီးမေးလ်ကို ကာကွယ်ထားသည်]သို့မဟုတ်[အီးမေးလ်ကို ကာကွယ်ထားသည်]ကျေးဇူးပြု၍ သို့မဟုတ် +86 15810650221 သို့ ဖုန်းခေါ်ဆိုပါ သို့မဟုတ် Whatsapp +86 15810650221 သို့မဟုတ် Wechat: 15810650221 သို့ ပေါင်းထည့်ပါ။

Whatsapp သို့မဟုတ် WeChat တွင် ထည့်ရန် QR ကုဒ်ကို စကန်ဖတ်ပါ။

၂


စာတိုက်အချိန်- စက်တင်ဘာ-၂၀-၂၀၂၄